兩因素假說1972年，Mazur將1949年以來人們經(jīng)過20多年的探索得到不同類型細(xì)胞的冷凍速率和細(xì)胞存活率的關(guān)系整理成曲線，說明每種細(xì)胞有一個最佳的冷卻速率，如圖3-1所示。由此，他認(rèn)為造成冷凍損傷有兩個獨(dú)立的因素，一是過快的冷卻形成胞內(nèi)冰，造成膜的機(jī)械損傷，且冷卻速率越快損傷也越大；二是慢速冷卻時，胞外結(jié)冰而胞內(nèi)尚未結(jié)冰，胞內(nèi)的水分子會在水蒸氣分壓差推動下，滲透到胞外凍結(jié)，造成胞內(nèi)外溶質(zhì)濃縮，而產(chǎn)生溶質(zhì)損傷，且冷卻速率越慢，其損害也越大。綜合上述兩種因素的影響，得出如圖3-2所示的總的效果曲線。如圖32所示，對于某一種細(xì)胞，存在著某個最佳的冷卻速率，對應(yīng)有最大的存活率，過快或過慢的冷卻速率，都會導(dǎo)致細(xì)胞的損傷增大，降低存活率。